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細胞計數時的要點你都清楚么?

  • 發布日期:2022-04-26      瀏覽次數:556
    •   細胞計數又稱血球計數板法,是細胞計數方法,顯微鏡下調整不同放大倍數的物鏡,通過染色的方法人工觀察細胞狀態判斷細胞死活,進行計數。通過檢測出一定體積的均勻細胞懸液中的細胞個數(對一定數量的小格或中格計數,根據相應的小/中格所占的體積,可以推算出單位體積的溶液中微生物細胞的密度或總數),換算出每毫升的細胞個數,從而得到細胞懸液的細胞濃度。實驗過程中采用五點取樣法,即一般隨計數室四角上的四個中方格以及正中間的一個中方格進行統計(對于壓線的,采取數上不數下,數左不數右的原則)。這種方法數細胞的原則是只數完整的細胞,若細胞聚集成團時,按照1個細胞計算。
        細胞計數要點:
       ?、龠M行細胞計數時,要求懸液中細胞數目不低于1×107 L-1,如果細胞數目很少要進行離心再懸浮于少量培養液中。
       ?、谝蠹毎麘乙褐械募毎稚⒘己?,否則影響計數準確性。
       ?、廴佑嫈登?,應充分混勻細胞懸液,尤其時多次取樣計數時更要注意每次取樣都要混勻,以求計數準確。
       ?、軘导毎脑瓌t是只數完整的細胞,若細胞聚集成團時,只按照1個細胞計算。如果細胞壓在格線上時,則只計上線,不計下線,只計右線,不計左線。
       ?、莶僮鲿r,注意蓋片下不能有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中,否則要重新計數。
        初學者易犯的錯誤:計數前未將待測懸液吹打均勻。滴入細胞懸液時蓋玻片下出現氣泡。滴入懸液時的量太多,至使細胞懸液流入旁邊的槽中。
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